细胞培养及细胞房的使用小课堂

细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中称为细胞培养技术。细胞培养技术是研究细胞生物学重要的和常用的技术，通过细胞培养既可以获得大量的细胞，又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。

当我们第一次开始培养某种细胞时，第一步一定是要先查资料，查阅相关文献来获得关于该细胞的详细信息：细胞类型、形态、培养条件、所用培养基、血清、添加剂、通常的消化时间、传代时间等以便了解到准确的培养方法。

在进入细胞房前，先换专用鞋子；

进入缓冲间，穿衣，戴帽，口罩，戴手套；

消毒后，才可进入实验室；

每天工作完成时，最后一个人需负责关掉空调及细胞房门；

注意事项：

加强自身实验素养，具备在对自己负责的同时必须对他人负责的思想

每天使用细胞房之前，必须将缓冲间用紫外灯照射30分钟；

消毒结束后，通用15分钟后才可使用；

细胞房的拖鞋仅能在细胞房内使用，不得穿出；

进入缓冲间必须换衣服，戴帽，口罩及手套。

不得将外来人员带入；

保持细胞房内外地面、桌面的清洁、整齐、不得有杂物和废弃物。

关于培养箱

打开培养箱之前，必须将手套上喷上消毒剂；

拿细胞时动作要迅速，并随手将培养箱门关上；禁止培养箱不关，避免反复开关；

记住放置细胞的位置，不经他人允许，不得动别人的细胞；

每个人都有义务和责任经常观察CO2钢瓶中气体的使用情况；

关于离心机

离心细胞必须打开制冷开关；

离心时，离心管必须平衡；

离心结束时，依次关制冷开关、总开关、拔电源；

关于显微镜

保持载物台清洁；

载物台上的所有附件用后，全部放回载物台；

用后，一定记住关电源。

关于生物安全柜

掌握正确地开门和使用方式；

实验前，必须点燃酒精灯，并用酒精棉将台面消毒；

实验过程中，手臂不能与台面接触；

取用安全柜的所有物品，必须注意避免双手与装有内容物的无菌区域接触；

枪头盒放置的位置、烘干过的物品在放入安全柜后，需照射30分钟后才能使用。

实验结束后，托盘内所有废弃物必须全部移走，固体物可倒入垃圾桶、液体必须倒入细胞房外的水槽，并冲洗。

实验结束后，必须用酒精棉将台面消毒。

紫外灯照射

关于水浴箱

用前，先检查箱内是否水，并将小容器内的水换上新的超纯水；

温度为37度，预热2小时；

用完后，关开关及电源。

关于无菌操作

所有用的溶液和耗材都是无菌的。如果有的溶液和耗材不确定是无菌的，请勿使用。除非特殊情况，一般不要借用他人的溶液。

检查酒精灯内的酒精量，如有不足及时进行补充。

将实验需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。

尽量不要直接倾倒溶液。

实验结束后，立即清理，用75%酒精清洁台面，保持工作区域清洁整齐。

关于细胞房的清洁

每周必须做一次清洁；

培养箱内用消毒水擦拭，之前将所有的细胞瓶盖旋紧，移动细胞瓶时一定要当心；

整理桌面、用专用抹布将桌面擦干净。

用专用拖把依次将缓冲间及外面的过道各擦2次；

倒垃圾

紫外灯照射30分钟；